HIV-1/2

NOMBRE Y FINALIDAD DE USO:

Determine "HIV 1/22" es un inmunoanalisis cualitativo in vitro de lectura visual para la detección  de anticuerpos de los virus  VIH-1 y VIH 2 en suero plasma o sangre hematica . Esta practica esta indicada como ayuda de la detección de anticuerpos al VIH 1/ VIH" en muestras de individuos infectados

OBJETIVO:

Que el alumno pueda conocer la reacción en placa ante anticuerpos de VIH 1 y VIH 2 en suero del paciente infectado ademas de conocer las precauciones necesarias al manejar esas muestras qeu son consideradas de alto riesgo.

INTRODUCCIÓN:

El VIH es un virus que afecta a una cierta cantidad de la población mundial, comparte con los retrovirus las características esenciales de esa familia. Elvirión contiene información genética bajo la forma de ácido ribonucléico (ARN), protegido por una envoltura de membrana. 

Ademas se conoce que esta enfermedad baja las defensas inmunologicas del afectado y que esto lo puede llevar a la muerte a una edad temprana o también ya en una edad adulta.

MATERIAL:

-Equipo de prueba para la prueba

-Pipeta 

-Muestra sanguínea

ADVERTENCIAS:

-Utilice guantes

-No pipete con la boca

-No coma , no bebe, cosméticos y no utilice lentes de contacto en el area donde se realiza la prueba.

-Limpie y desinfecte las salpicaduras de la muestra en el área de trabajo.

-deseche correctamente todo el material utilizado para esta prueba.

PROCEDIMIENTO:

1.- Retire el plástico de  protección de los ensayos.

2.- Para muestras de suero o plasma. 

a. Dispense 50 ul de muestra (con una pipeta de presición ) en la superficie absorbente (señalada con una flecha).

b. Esperar entre un mínimo de 15 minutos y un máximo de 60 minutos para leer el resultado .

3.- Para muestras de sangre (venopuncion):

a.Dispense 50 ul de muestra ( con una pipeta de presición ) en la superficie absorbente (señala con una flecha)

b. Espere un minuto y dispense  una gota de tapón de arrastre en la superficie absorbente.

c. Espere un minuto de 15  minutos y un máximo de 60 minutos para leer el resultado

4.- para muestras de sangre (punción digital)

a. Dispense 50 ul de muestra con tubo capilar con EDTA) en la superficie absorbente (señalada con una flecha)

b. Espera hasta la sangre impregne totalmente la superficie absorbente ya a continuación dispense una gota de tapón de arrastre en la superficie absorbente.

c. Espere entre un mínimo de 15 minutos y un máximo de 60 minutos para leer el resultado..

RESULTADOS

  POSITIVA

CONCLUSIÓN: 

Con esta sencilla prueba se determina si el  paciente tiene oh no VIH .

PRACTICAS:

"PRUEBA DE RUMPEL. LEEDE" Y "RETRACCION DE COAGULO"

OBJETIVO:

Que el alumno logre realizar la prueba del torniquete satisfactoriamente con el fin de poder identificar petequias en una zona identificada del brazo del paciente manteniendo una precion en el mismo durante 5 minutos.

INTRODUCCION:

Las petequias son pequeñas manchas de una coloracion rojiza formadas por extravasación de un número pequeño formadas por extravasación de un número pequeño de eritrocitos cuando se daña un capilar. Estas mismas son pequeños derrames vasculares cutáneos del tamaño de una cabeza de alfiler.

MATERIAL

-Torniquete o manguito inflable del tenciometro.

- Marcador

-Cronometro

PROCEDIMIENTO

Consiste en mantener elevada la presion en un miembro por un periodo de 5 minutos, con un lazo o el manguito inflable del tensiometro como para medir la T.A y comprimirlo con una presión menor que la sistolica pero mayor que la diastolica para producir estasis sanguinea en las venulas capilares.

material a estudiar: observcion de la piel luego de interrumpir la circulatorio venosa. Se realiza el recuento de las petequias (pequeñas manchas hemorragicas en un circulo de 5 cm de diámetro) normalmente no se debe producir mas de 5 petequias por debajo de la coprencion , especialmente en la cara palmar del antebrazo próxima al manguito neumático. Mas de diez petequias , y sobre todo extendidas mas allá del cuarto superior del antebrazo  es patológico.

Preparación previa:

no es necesaria. No repeteir en el mismo miembro antes de los 7 días.

RESULTADOS:

Valores normales: ninguna petequia o hasta diez petequias en un área de 5 cm, Escala para informar en numero de petequias:

0 A 10= 1 +

10 A 20= 2 +

20 A 50= 3 +

50 o mas petequias = 4 +

valores aumentados: pueden indicar coagulación intravascular difusa, disminución del fibrinogeno, disminución de la protrombina, deficiencia del factor Vll, trombiocitopenia, tromboastenia  enfermedad de von Willebrand, deficiencia de vitamina K . Y puede estar asociado a afecciones no relacionadas con los trastornarnos de la coagulación como: escarlatina , hipertension , diabetes, gripe, sarampion, escorbuto.

Tambien es anormal la prueba en las trombopatias quiza debido a que por falla plaquetaria no hay vasoconstriccion adecuada ni formacion de trombo blanco.

Confiabilidad de los resultados: Buena

Medicamentos que pueden alterar los resultados: Corticoesteroides.

RESULTADOS:

  4 PETEQUIAS EN UN CIRCULO CON UN  RADIO DE 5 CM (+)

CONCLUSIÓN:

EL FIN DE REALIZAR ESTA PRACTICA DIAGNOSTICAR LA FRAGILIDAD DE LAS PAREDES CAPILARES DE EL PACIENTE.

PRACTICA:

"RETRACCIÓN DEL COAGULO"

OBJETIVO:Al termino de la practica el alumno sera capaz de realizar a interpretar la prueba de R.C

INTRODUCCIÓN: Puesto que el coagulo de fibrina encierra los elementos organizados (celulares) de la sangre (in vitro e in vivo) el volumen de glóbulos rojos establece el limite inferior de la retracción de la fibrina. Por lo tanto, siendo normales los demás factores, el coagulo se retrae tanto mas cuanto menor es el hematocrito. La retracción es directamente proporcional al numero de plaquetas, e inversamente al hematocrito. Cuando las fibrinolinas son muy activas la fibrina puede disolverse casi tan rápidamente como se forma, y la retracción del coagulo se modifica en los trastornos de este tipo: choque, quemaduras, etc.

mide la cantidad de fibrina formada y su retraccion; asi como al numero de funcion de las plaquetas, pues poseen una proteína similar a la actomisina, que produce la retracción del coagulo.

MATERIAL:

-Tubos de ensaye para centrifuga 

-Alambre de 1mm. de grosor

-Baño Maria de 37ºC

-Equipo de venopuncion.

TÉCNICA

1.- Se pone en un tubo de centrifuga graduado de 5 ml. de sangre venosa recién obtenida. Se lleva el alambre al fondo del tubo.

2.- Se pone el tubo en el alambre, de un baño de agua a 37 ºC en donde se deja 1hr. Después de la formación del coagulo sin tocarlo.

3.- Se saca el alambre cuidadosamente y se deja escurrir dentro del tubo el coagulo unido al alambre durante 1 a 2 min.

4.- Se lee el volumen del liquido que quedo en el tubo. El resultado se expresa como un porcentaje del volumen inicial de 5 ml.

Ejemplo: Si después de la coagulación 5 ml. De sangre suministraron 3 ml. de liquido.

La retracción es de :; 3X100= 60 por ciento.

                                                                                      5

VALORES NORMALES:

ENTRE 48 Y 64 POR CIENTO.

RESULTADOS:

1ER MUESTRA:    2ML      2X100= 40%  (POR DEBAJO DE LOS VALORES DE REFERENCIA)

                                                     5

2ª MUESTRA: 2.5 ML          2.5X100=50%  (DENTRO DE LOS VALORES NORMALES DE REFERENCIA)

                                                       5

CONCLUSIÓN:

CON ESTA PRACTICA SE ESTUDIO EL LIMITE INFERIOR DE LA RETRACCIÓN DE LA FIBRINA.

VDRL - USR

Introducción:

La Sífilis es una enfermedad generalizada, producida por Treponema pallidum.

Infecta el área genital, los labios, la boca o el ano y afecta tanto a los hombres como a las mujeres. Por lo general se adquiere por contacto sexual con una persona que la tiene. También puede pasar de la madre al bebé durante el embarazo. 

El diagnóstico se basa en la serología, con los métodos se determinan las 2 clases de anticuerpos:

• Cardiolipina: No treponema e inespecíficos.
• Antitreponemas: Específicos.

Debido a la facilidad  en su determinación en el tipo Cardiolopina se utilicen universalmente en las exploraciones iniciales, exámenes individuales o encuestas de población. La variante técnica más comúnmente empleada llamada VDRL (Venereal Disease Research laboratory) que determina la floculación en placa (cuantitativa) del antígeno con cardiolipina y lecitina.

Material:

• Antígeno en suspensión estabilizado (VDRL).
• Pipetas desechables.
• Placa cóncava.
• Agitador mecánico.
• Cronómetro.
• Microscopio.

Método cualitativo:

1.     En un anillo de la placa cóncava deposite 0.05 ml. del suero problema.

2.     En anillos diferentes colocar una gota de suero control positivo y en otra una gota de control 

negativo, extender sobre la superficie del anillo.

3.    Añadir una gota del antígeno en suspensión estabilizada previamente resuspendido.

4.    Colocar la placa sobre un agitador mecánico a 180 rpm. Durante 4 min. Las pruebas que se realicen en clima extremadamente seco puede provocar la evaporación de las muestras, por lo tanto, la placa en rotación se puede cubrir con la tapa de una caja de petri humedecida previamente con una gasa. (Este paso se realizó de manera manual)

5.    Leer inmediatamente al microscopio con objetivo y ocular 10x.

Resultados:

Los dos sueros salieron negativos, no hubo floculación.

Conclusiones:

 La identificación del Treponema pallidum es posible después de la realización de la práctica anterior, mediante la observación de la floculación en las placas correspondientes. 

Es una practica muy sencilla pero no es tan segura ya que el echo de que salga negativo no significa que no exista la enfermedad pero para asegurarse se hacen mas pruebas.

                  ROSA DE BENGALA
                                   (antígeno brucelar amortiguador)

INTRODUCCION:

La brucelosis es una enfermedad causada por La bacteria Brucella esta  puede infectar al ganado vacuno, las cabras, los camellos, los perros y los cerdos. La bacteria se puede diseminar a los humanos si usted entra en contacto con carne infectada o la placenta de animales infectados o si bebe leche o come queso sin pasteurizar.

La prueba del Rosa Bengala o prueba del antígeno tamponado de

Brucella, es una técnica rápida de aglutinación en porta para la

detección de anticuerpos anti-Brucella en sueros animales y

humanos

La determinación se efectúa ensayando la suspensión tamponada

(pH 3,6) de  Brucella coloreada con Rosa Bengala frente a los

sueros problema. La presencia o  ausencia de aglutinación visible

es indicativa de la presencia o ausencia de anticuerpos en las

muestras ensayadas.

FUNDAMENTO:

Para realizar esta técnica es importante saber que es utilizada para un diagnostico temprano de brucelosis ya que es especifica  por la detección de aglutinas de brucella de forma rápida.

MATERIAL Y REACTIVOS:

v  Antígeno rosa de bengala

vControl positivo de brucella

vControl negativo de brucella

vPlaca

vPipetas  automáticas.

Esta prueba puede ser utilizada para un diagnostico temprano.

Obtención de la   muestra:

•Obtener 3.0 ml de sangre por punción venosa

•Centrifugar y separar el suero.

PROCEDIMIENTO:

v utilizar una pipeta automática que adicione 0.03ml de muestra de suero en el circulo de la placa.

vMezclar el antígeno rosa de bengala hasta que este totalmente homogenizada, después colocar 0.03ml en la placa en el mismo aro donde esta la muestra , s mezcla con un aplicador. Repetir paso para los controles.

vAgitar la placa con movimientos rotatorios por 4 minutos.

vObservar el resultado con la ayuda de una fuente de luz ,leer directamente.

RESULTDOS:

NEGATIVO

CONCLUSION:

En el diagnóstico clínico, los resultados de la determinación de los 

anticuerpos anti-Brucella deben ser considerados siempre en

relación a los hallazgos clínicos y otras pruebas de laboratorio. Es por esto el por que de la importancia de esta técnica.